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晶抗生物小鼠食管上皮細胞操作步驟

小鼠食管上皮細胞用于科研以生物技術為主的研發、生產、培訓為—體的綜合化產業平臺，公司在標準化細胞庫建立及細胞藥物前端模型方面成果顯著，我們秉承對用戶負責的態度，以對科研的高度嚴謹，以嚴格的質量控制，為廣大生物醫學科研用戶提供更的服務!

培養工作中，主要從以下幾個方面來預防細胞支原體的污染：

A. 控制環境污染

B. 嚴格實驗操作

C. 細胞培養基和器材要保證無菌

D. 在細胞培養基中加入適量的抗生素

E. 避免細胞污染，可以從預防著手，超凈工作臺物品放置要合理、進入細胞房要換鞋和穿實驗服、實驗員戴手套后要用酒精等消毒、避免細胞交叉污染等等

培養準備和安裝過濾器：

清洗好過濾器，干燥，放入一張孔徑0.22μm的微孔濾膜，用布包裝好，15磅20 min進行高壓滅菌處理。 在超凈臺內打開過濾器架好，膠管一端接入濾泵再插入待除菌的液體中，出口端膠管深入到已消毒好的瓶子中。用泵過濾，過濾后要檢查濾膜是否完好無損。

保存應用及安全性：

保存應用：新鮮細胞，請于收到后放入二氧化碳培養箱內靜置2-3小時后再進行實驗操作；如是凍存細胞，收到后可放入液氮或-80℃冰箱保存也可進行復蘇操作。

安全性：所有腫瘤和病毒轉染的細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。收到細胞后，在倒置鏡下(是在4X物鏡)觀察整個細胞生長情況。

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細胞復蘇步驟：

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

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