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看完便知使用兔elisa試劑盒的方法及注意事項
更新時間:2021-06-22   點擊次數(shù):1456次
  今天為大家?guī)硪黄褂?strong>兔elisa試劑盒的方法及注意事項,如對此方面有所需求的還請不要錯過了,那么話不多說下面就讓我們一起來看看吧。
 
  一、兔ELISA檢測試劑盒操作步驟:
 
  1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
 
  2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
 
  3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
 
  4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
 
  5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
 
  6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
 
  7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
 
  8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
 
  9.在450nm波長處測定各孔的OD值。
 
  二、兔ELISA試劑盒注意事項:
 
  1)試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。
 
  2)實驗中不用的試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。
 
  2)實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
 
  3)不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
 
  4)使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
 
  5)使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
 
  6)洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
 
  7)底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
 
  8)加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
 
  9)按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
 
  以上內(nèi)容便是本次為大家分享關(guān)于兔elisa試劑盒的相關(guān)操作及使用注意事項,希望大家在看完之后能夠?qū)υ摦a(chǎn)品有更多的了解。
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